美國(guó)伯樂(lè) 生物制藥測(cè)試開發(fā)抗體

產(chǎn)品名稱：生物制藥測(cè)試開發(fā)抗體
制造廠商：美國(guó) 伯樂(lè)
產(chǎn)品型號(hào)： Bio-Rad
產(chǎn)品描述/技術(shù)指標(biāo)：

生物制藥測(cè)試開發(fā)抗體

Bio-Rad 專為治療性抗體開發(fā)了高特異性、高親和性檢測(cè)抗體，用于支持藥物研發(fā)企業(yè)的臨床前研究、臨床試驗(yàn)及病人監(jiān)測(cè)，這些抗體可用于原研藥或生物類似藥的檢測(cè)。我們使用獨(dú)有的 HuCAL® 重組單克隆抗體庫(kù)并改進(jìn)了噬菌體展示技術(shù)，開發(fā)出了全人化完整抗體及 Fab 段抗體。

我們用于生物制藥檢測(cè)的先進(jìn)抗體具備如下特點(diǎn)：
n 應(yīng)用數(shù)據(jù)及標(biāo)準(zhǔn)操作流程支持用戶的藥代動(dòng)力學(xué)（ PK ），抗藥物抗體（ ADA ）及抗體中和實(shí)驗(yàn)
n 高特異性及高靈敏度，用于優(yōu)化的測(cè)試實(shí)驗(yàn)
n 中和抗體可與藥物 / 靶點(diǎn)復(fù)合物結(jié)合
n 推薦的 ELISA 檢測(cè)抗體直接偶聯(lián)了 HRP
n 有全人免疫球蛋白作為對(duì)照，用于 ADA 測(cè)試的標(biāo)準(zhǔn)曲線建立
n 大包裝和一致性的抗體供應(yīng)，以支持制藥企業(yè)的臨床前和臨床試驗(yàn)研究
n 每次分析都提供可靠的數(shù)據(jù)結(jié)果

用于抗體藥物測(cè)試實(shí)驗(yàn)的抗體



底物結(jié)合測(cè)試用關(guān)鍵試劑的表征
抗體質(zhì)量控制
批間一致性
對(duì)于完整結(jié)構(gòu)的 IgG 抗體產(chǎn)品，其批間一致性采用橋聯(lián) ELISA 方法進(jìn)行檢測(cè)并比較結(jié)果
圖 1 顯示了抗體檢測(cè)結(jié)果的批間一致性（以 anti-palivizumab 抗體為例）



圖 1. 批間一致性。
使用 1 ug/mL 的 palivizumab 過(guò)夜包被微孔板。清洗后使用 PBST + 5% BSA, 含 10% 人血清的 PBST 進(jìn)行封閉，逐步添加不同濃度的人 anti-palivizuman 抗體（ HCA262，Lot1-4 ）。使用HRP 偶聯(lián)的 palivizumab 及 QuantaBlu ™ 辣根過(guò)氧化物酶熒光底物進(jìn)行檢測(cè)。HRP 與 palivizumab 單抗的偶聯(lián)是采用 LYNX 快速 HRP 抗體偶聯(lián)試劑盒完成的。顯示的數(shù)據(jù)是三次檢測(cè)的平均值。EC50 值（右表）由非線性擬合獲得。

批次放行質(zhì)量控制
每個(gè)新產(chǎn)品在研發(fā)初期都會(huì)獨(dú)立生產(chǎn)三個(gè)批次。其批次活性對(duì)比涉及：Fab 段抗體的 ELISA滴定（圖 6 ），完整 IgG 分子的 ADA 橋聯(lián) ELISA（圖 1、7 ）。其中接近平均曲線的那個(gè)批次會(huì)被設(shè)定為以后的參考批次。每個(gè)新的批次都會(huì)用來(lái)和參考批次做對(duì)比以確認(rèn)符合要求。
在放行前，新的批次抗體都會(huì)進(jìn)行特異性和純度（圖 2、3 ）分析。對(duì)于完整結(jié)構(gòu)的 IgG，還會(huì)使用 SEC 來(lái)分析單體 / 聚合體分布（圖 4 ）。
另外，對(duì)于新的批次抗體，其對(duì)應(yīng)基因都會(huì)被重新測(cè)序，以確認(rèn)產(chǎn)品SDS PAGEFab 段的抗體使用 SDS PAGE 方法來(lái)確定其純度，并采用考馬斯亮蘭染色（圖 2 ）。



圖 2. Fab 段抗體純度檢測(cè)。
人 anti-trastuzumab（ HCA167 ）及 anti-infliximab（ HCA212 ）Fab 段抗體純度使用 SDS PAGE 方法進(jìn)行分析（每個(gè)泳道 2ug 蛋白）。重鏈（ H ）及輕鏈（ L ）分別位于約32kDa 及 28kDa 的位置。
抗體藥物檢測(cè)抗體的不同結(jié)合模式

專業(yè)設(shè)計(jì)的抗體選擇策略產(chǎn)生了以上三種抗體結(jié)合模式